天然鼠源噬菌体抗体库的构建及抗羊抑制素基因工程单抗的筛选
2009-01-10分类号:S826
【部门】中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 山东农业大学动物科技学院
【摘要】【目的】构建单链抗体(ScFv)噬菌体表面展示文库,从中筛选抗羊抑制素单抗并进行表达,建立制备羊抑制素单抗的新方法。【方法】用未经免疫的多种小鼠脾细胞作为基因来源,采用噬菌体抗体库技术,构建天然噬菌体表面抗体文库。用羊抑制素对其进行3轮吸附-洗脱-富集,筛选抗羊抑制素单抗,用ELISA检测其抗原结合活性。【结果】构建了天然鼠源噬菌体抗体库,为筛选和制备各种单链抗体提供了一个平台。用羊抑制素对其进行筛选,制备抗羊抑制素单抗,经ELISA检测,55/96克隆具有与羊抑制素结合活性,阳性率为57%。【结论】制备的羊抑制素可溶性ScFv及其表面展示噬菌体抗体有很好的抗原结合活性,为羊抑制素单抗的制备提...
【关键词】噬菌体抗体库 单链抗体 羊
【基金】北京市自然科学基金资助项目(5032012)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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