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黑曲霉木聚糖酶基因(xynA)在大肠杆菌中的表达及酶学分析

2009-02-15分类号:S816

【作者】崔罗生  祝茂生  徐顺清  朱辉  梁运祥  张忠明  
【部门】华中农业大学生命科学技术学院  
【摘要】从黑曲霉(Aspergillus niger)F19中克隆得到木聚糖酶基因xynA。将不带原基因信号肽编码序列的xynA基因片段以正确的阅读框架克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET-28a(+)上,并转化E.co-liBL21,获得重组工程菌BLX1。经过IPTG诱导,xynA获得特异性表达,其表达产物以包涵体和胞内可溶性蛋白2种形式存在。经过SDS-PAGE分析,重组蛋白分子质量约为24 ku。酶学分析表明,最适反应温度为50℃,最适反应pH为5.0,在酸性条件下具有较好的稳定性。
【关键词】黑曲霉  木聚糖酶  xynA基因  酶学性质
【基金】浙江省重大科技攻关项目(2004C12010)资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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