【摘要】以改良的CTAB法提取的狗牙根叶片DNA为模板,采用单因素多水平方法对狗牙根ISSR反应体系进行构建和优化,系统分析Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物和buffer这6种ISSR反应成分的浓度对扩增结果的影响,结果表明:20.0μL PCR反应体积中,20.0 ng模板DNA,0.4μmol/L引物,0.5 mmol/L Mg2+,0.05 mmol/L dNTPs,0.2 U Taq DNA聚合酶,2.0μL 10×buffer.反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性45 s,55℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,35个循环;再72℃延伸7 min,4℃保温.