月季SSR-PCR反应体系的建立和优化
2009-06-28分类号:S685.12
【部门】北京林业大学园林学院国家花卉工程技术研究中心
【摘要】采用L16(54)正交设计和二因素完全随机试验,分析了月季SSR-PCR反应体系的主要成分TaqDNA聚合酶、样本浓度、Mg2+浓度d、NTP浓度以及引物浓度对扩增结果的影响,建立了适合月季的SSR反应体系。研究结果表明:在20μL反应体系中,TaqDNA聚合酶宜加入1.5 U,样本最适宜浓度为30~40 ng,Mg2+的最适浓度为1~1.5 mmol/L,dNTP最适浓度为0.2 mmol/L,单引物的最适浓度均为1μmol/L。用建成的反应体系对19对引物筛选,对12个月季品种扩增,3%的琼脂糖凝胶电泳检测,品种间DNA谱带多态性丰富,证明该体系稳定可靠。
【关键词】月季 SSR 正交试验 反应体系
【基金】“948”重大项目(No.2006-4-C08); 国家环保总局重点项目(No.2004BA525B11)
【所属期刊栏目】华北农学报
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