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柑橘线粒体DNA高效提取及RAPD分析

2009-10-15分类号:S666

【作者】伊华林  霍岩  
【部门】华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室/国家柑橘育种中心  
【摘要】以柑橘胚性愈伤组织为试材,采用差速离心结合蔗糖衬垫法建立了柑橘线粒体快速、高效分离纯化技术体系,得到的线粒体完整,具有很强的荧光活性。利用SDS法提取、纯化的线粒体DNA(mtDNA)经紫外分光光度计分析,A260 nm/A280 nm值为1.80、A260 nm/A230 nm值为1.95;0.7%琼脂糖电泳检测获得的谱带清晰,长度在20 kb左右,无降解。本研究建立的方法与通常采用的密度梯度离心法相比,具有耗时短、对离心机的要求不高,且所提取的mtDNA产率高、结构完整等特点。以建立的技术体系提取7个柑橘品种的mtDNA进行RAPD分析,均扩增出清晰、多态性好的谱带,大小分布在250~2 ...
【关键词】柑橘  mtDNA  RAPD  差速离心
【基金】国家科技支撑计划(2006BAD01A1702,2007BAD61B04,2007BAD47B01,2008BAD92B05); 农业部跨越计划项目资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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