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山葡萄cDNA-AFLP体系的建立及引物的筛选

2009-04-28分类号:S663.1

【作者】唐美玲  孔瑾  徐维华  韩振海  
【部门】烟台市农业科学研究院果树所  中国农业大学园艺植物研究所  
【摘要】以山葡萄品种左山一的叶片和花芽为材料,对cDNA-AFLP体系的几个关键因素进行摸索,建立了适宜山葡萄的cDNA-AFLP反应体系。结果表明,提取山葡萄的花芽RNA适宜用改良的CTAB法,提取叶片RNA适宜用SDS-酸酚法。在2×Y/TBuffer的作用下,500 ng的cDNA利用MseI与EcoRI双酶切4 h即可酶切完全,将16℃连接过夜的产物稀释5倍作为预扩增的模板,预扩增产物稀释20倍作为选扩模板能获得带型稳定可重复性好的结果。
【关键词】山葡萄  cDNA-AFLP
【基金】国家自然科学基金项目(30671441;30600416); 国家“863”项目(2006AA10Z1B6)
【所属期刊栏目】华北农学报
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