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根癌农杆菌介导Barnase基因转化‘美人指’葡萄的研究

2009-01-30分类号:S663.1

【作者】杨丽娜  刘捷  庄智敏  章镇  周蓓蓓  陶建敏  
【部门】南京农业大学园艺学院  
【摘要】以‘美人指’葡萄离体叶片及叶柄为农杆菌介导转化Barnase基因的受体,对农杆菌侵染时间、共培养时间、预培养时间、卡那霉素选择压以及头孢霉素浓度等因素进行了研究。结果表明:最佳的农杆菌介导‘美人指’葡萄遗传转化体系为农杆菌侵染4 min,共培养3 d,预培养3 d,卡那霉素选择压3.0 mg.L-1,头孢霉素质量浓度250 mg.L-1。采用此体系对‘美人指’葡萄进行转化,共获得了12株抗性苗,农杆菌感染后的不定芽再生率为1.78%。利用GUS组织化学染色、PCR扩增的方法进行检测,结果表明,其中只有2株GUS染色呈阳性,阳性率为16.67%;有3株通过了PCR检测,初步证实Barnase基因...
【关键词】‘美人指’葡萄  Barnase基因  GUS组织化学染色  PCR检测
【基金】江苏省农业资源开发局项目(2007kj-22); 江苏省科技厅科技推广项目(BG2007309); 江苏省农林厅三项工程项目
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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