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九节茶ISSR反应体系的建立及优化

2009-03-18分类号:S567.239

【作者】黄宇  荣俊冬  李凤涛  陈礼光  李洪光  何天友  郑郁善  
【部门】福建农林大学工业原料林研究所  
【摘要】以九节茶叶片提取的基因组DNA为材料,对影响ISSR-PCR扩增效果的一些因素,诸如dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶用量、引物用量、模板DNA用量、退火温度以及循环次数等指标进行筛选和优化.结果表明:20μL ISSR反应体系含10×PCR Buffer、0.4 mmol.L-1dNTPs、2 UTaqDNA聚合酶、0.6μmol.μL-1引物、5 ng模板DNA;PCR扩增程序为:94℃预变性2 min,94℃变性30 s,44.8℃退火30 s,72℃延伸1 min,35个循环,最后于72℃延伸7 min,置4℃保存.应用该ISSR体系对10份九节茶种质进行了扩增,证实了该体系的适用性和...
【关键词】九节茶  ISSR  反应体系  优化
【基金】福建省科技厅重大资助项目(2004YZ02-05); 福建省中药材GAP工程技术研究中心资助项目(2008Y2001)
【所属期刊栏目】福建农林大学学报(自然科学版)
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