【摘要】二乔刺槐叶片在添加5mg·mL-16-BA的MS培养基上诱导出愈伤组织。将愈伤组织在冻存液(MS+10%DMSO+0.5mol·L-1蔗糖)中于4℃预冷2h,置入程序降温仪以1℃.min-1的速率降温至-7℃停留1h,再以0.1℃.min-1的冷却速率将样品冷却至-20℃,平衡1h,接下来以0.3℃.min-1的冷却速率将样品冷却至-40℃投入液氮保存,是适宜的降温方法。液氮保存1天后以38℃温水浴解冻。解冻后将愈伤组织用液体培养基(MS+6-BA5mg·mL-1+30g.L-1蔗糖)洗涤后转入恢复培养基暗培养,14天后放于光照下培养。光培养3天后冻后愈伤组织上开始长出新生愈伤组织颗粒,成活率...