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高羊茅叶绿体表达载体构建及绿色荧光蛋白基因瞬时表达检测

2009-03-10分类号:S688.4

【作者】赵彤  于荣  黄丛林  王永勤  张秀海  吴忠义  
【部门】北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心  首都师范大学生命科学学院  
【摘要】【目的】验证高羊茅叶绿体表达载体在高羊茅叶绿体中的瞬时表达情况,为今后在高羊茅叶绿体中稳定表达该载体,获得耐旱高羊茅的叶绿体转基因株系奠定基础。【方法】首先从高羊茅草叶绿体基因组中克隆16S/trnI-trnA/23S片段,作为定点整合同源片段。然后将耐旱相关基因酵母海藻糖合酶基因tps1与水稻叶绿体16SrRNA基因的强启动子Prrn、烟草叶绿体基因psbA的终止子构建表达盒(Prrn-tps1-TpsbA-ter),连同草丁膦抗性基因bar表达盒、卡那霉素抗性基因nptII和绿色荧光蛋白基因gfp构建的融和基因表达盒一起克隆到定点整合同源片段之间,构建高羊茅叶绿体的稳定表达载体gTKGB。...
【关键词】高羊茅  叶绿体表达载体  定点整合  重叠延伸PCR法  瞬时表达  GFP荧光
【基金】北京市基金项目(5062012); 国家自然科学基金项目(30400228,30600318)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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