中国野生华东葡萄抗霜霉病抑制消减文库构建及初步分析
2009-03-10分类号:S663.1
【部门】西北农林科技大学园艺学院/农业部西北园艺植物种质资源及遗传改良重点开放实验室/陕西省农业分子生物学重点实验室
【摘要】【目的】分离和获得中国野生华东葡萄抗霜霉病相关基因片段的EST序列。【方法】以高抗霜霉病的中国野生华东葡萄(V.pseudoreticulata)白河-35-1株系为材料,以田间接种葡萄霜霉菌的幼嫩叶片为处理,以田间自然生长的未接种幼嫩叶片为对照,分别提取RNA,采用抑制消减杂交技术构建抗霜霉病基因的消减正交和反交两个文库,在文库中,选择3个EST序列,用半定量PT-PCR检验构建文库中EST片段的表达情况。【结果】构建的文库中EST片段的大小在150~900bp,经筛选文库,得到正交库有效的ESTs85条,反交库ESTs29条,所获序列经过BLASTn和BLASTx网上序列比对,其中有78条...
【关键词】中国野生葡萄 抑制消减杂交 霜霉病 EST序列
【基金】国家自然科学基金项目(30571280,30771493)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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