不结球白菜硝酸还原酶基因BcNR的克隆及其在拟南芥中的转化
2009-02-10分类号:S634.3
【部门】南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室 南京农业大学园艺学院
【摘要】【目的】克隆不结球白菜硝酸还原酶基因(BcNR),并转化拟南芥做初步的功能鉴定。【方法】采用分段RT-PCR及3′RACE和5′RACE技术克隆了BcNR基因的全长cDNA,利用生物信息学方法进行序列分析和蛋白结构分析。构建pCAM-BcNR植物过量表达载体,通过农杆菌介导的真空渗透法将其转入野生拟南芥中,经抗性筛选及PCR验证获得T0代转基因植株,用Real-timePCR方法对30mmol·L-1KNO3溶液处理的转基因拟南芥的硝酸还原酶基因表达进行检测,并测定转基因植株的硝酸还原酶活性。【结果】获得了编码不结球白菜硝酸还原酶基因(BcNR)的cDNA全序列3049bp,包含有2733bp...
【关键词】不结球白菜 硝酸还原酶 克隆 功能鉴定
【基金】国家自然科学基金项目资助(30500343)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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