稻瘟病菌一假定几丁质酶在毕赤酵母中的表达
2009-11-18分类号：S435.111.41
【部门】福建农林大学生命科学学院 福建农林大学植物保护学院
【摘要】本研究从稻瘟病菌菌株Guy11中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增到一假定几丁质酶基因MGG_08054.6的cDNA序列,将其亚克隆至带有His-tag标签的酵母表达载体pPIC3.5K中,构成重组质粒pPIC3.5K-ws,电击转化至毕赤酵母菌菌株GS115,通过MD-MM平板筛选及PCR验证获得重组酵母转化子GS115-PICH-ws;阳性转化子在甲醇诱导下,成功分泌出重组蛋白.SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子质量为48 ku,与其理论计算值基本相符;Ni-NTA法分离纯化后的重组蛋白经DNS法测定具有几丁质酶活性.
【关键词】稻瘟病菌 几丁质酶 毕赤酵母 表达
【基金】国家自然科学基金(30471132,30500325); 福建省自然科学基金(2007J0048)资助项目
【所属期刊栏目】福建农林大学学报(自然科学版)
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