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DT40细胞sIgMλ轻链基因敲除载体的构建

2009-06-28分类号:Q782

【作者】游雷鸣  罗俊  王爱萍  张改平  卜丹  郭亚男  祈艳华  
【部门】河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室  郑州大学生物工程系  
【摘要】从鸡B淋巴DT40细胞系中克隆-βactin启动子,替换pCDNA3.1(+)载体中的SV40启动子,构建-βactin启动子驱动的Neomycin抗性基因表达框。将克隆的sIgMλ轻链基因两侧各约2 kb的序列插入到抗性表达框的两侧作为同源臂。PCR、酶切以及测序结果表明成功构建了靶向sIgMλ轻链基因的置换型打靶载体pCDNA-act-neo-HR。为建立sIgMλ轻链基因敲除的DT40细胞模型,探究sIgMλ轻链在IBDV感染DT40细胞过程中的作用奠定了基础。
【关键词】sIgMλ轻链  -βactin启动子  基因敲除  同源重组
【基金】“十一五”国家科技支撑计划(2006BAD06A04-6); 河南省基础与前沿技术研究计划(082300433201)
【所属期刊栏目】华北农学报
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