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黑曲霉葡萄糖氧化酶基因的原核表达及其蛋白产物的Western-blot分析

2009-08-28分类号:Q78

【作者】安玉麟  孙瑞芬  张鹤龄  郭树春  闫素丽  
【部门】内蒙古农牧业科学院生物技术中心  内蒙古大学生命科学学院  内蒙古农业大学农学院  
【摘要】为进一步研究黑曲酶中国株3.758葡萄糖氧化酶(GOD)在大肠杆菌中的表达水平和条件,将黑曲霉中国株3.758的葡萄糖氧化酶(GOD)基因定向克隆于原核表达载体pET-11a上,构建了融合表达的重组质粒pET/GO,转化E.coliBL21(DE3)plysS,用IPTG诱导,超声波粉碎细菌细胞,SDS-PAGE电泳检测,GOD基因获得了表达,表达的融合蛋白相对分子质量为66.5 kDa。用市售葡萄糖氧化酶免疫家兔获得抗血清,酶联法(ELISA)测定其效价为106,West-ern-blot分析证明表达的融合蛋白与兔抗GOD血清有较强的特异性,为黑曲霉3.758葡萄糖氧化酶(GOD)抗体的制备...
【关键词】黑曲霉3.758  葡萄糖氧化酶基因  融合表达  抗血清  ELISA  Western-blot
【基金】内蒙古自治区优秀学科带头人计划项目(20050802)
【所属期刊栏目】华北农学报
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