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超分支滚环扩增法检测小麦矮腥黑穗菌

2009-10-10分类号:S435.121

【作者】蔡俊  殷幼平  葛建军  陈洪俊  黄冠军  张雯迪  王中康  
【部门】重庆大学生物工程学院基因工程研究中心/重庆市功能基因与调控技术重点实验室  中国检验检疫科学院动植物检疫研究所  
【摘要】【目的】建立小麦矮腥黑穗病菌(Tilletia controversa Kühn,TCK)的超分支滚环扩增(hyper-branched rolling cycle amplification,HRCA)检测体系,为小麦矮腥黑穗病的鉴定以及早期诊断提供了一种新的稳定、可靠的检测技术。【方法】锁式探针包含一个公共连接序列和在探针两端与靶DNA序列互补的2个序列。根据TCK的差异序列设计锁式探针两端序列,以此为基础建立了TCK超分支滚环扩增反应体系。以优化的HRCA反应条件为基础,确定检测体系的特异性和灵敏度。比较HRCA体系和常规PCR体系的性能,并利用这2种体系对来自中国出入检验检疫局截获的5...
【关键词】小麦矮腥黑穗病  超分支滚环扩增  锁式探针  检测
【基金】国家“863”计划(2006AA10Z434); 农业部攻关项目(农财发[2008]60号)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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