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鸡骨保护素在毕赤酵母中的分泌表达及生物学活性测定

2009-04-30分类号:Q786

【作者】姚静  胡云峰  王艳  张风荣  侯加法  
【部门】南京农业大学动物医学院  无锡市畜牧兽医局  
【摘要】为了在毕赤酵母中表达鸡骨保护素(chOPG),采用DNA重组技术将鸡OPG成熟肽cDNA片段插入毕赤酵母表达载体pPICZα-A中,以电穿孔法转化酵母X-33,用Zeoc in平板筛选阳性重组子,经甲醇诱导,实现了OPG在毕赤酵母中的分泌表达。SDS-PAGE电泳分析结果显示,表达产物存在两种形式,其相对分子质量分别为43000和53000,表达量约为200 mg.L-1,经免疫印迹验证,有较好的抗原性。表达产物经处理后加入到体外培养的鸡胚破骨细胞上,能显著抑制成熟破骨细胞的骨吸收活性,减少骨吸收陷窝的个数与面积。
【关键词】鸡骨保护素  毕赤酵母  分泌表达  破骨细胞
【基金】国家自然科学基金项目(30671546); 教育部重点项目(107059); 江苏省自然科学基金项目(BK2004099)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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