杀鲑气单胞菌的实时定量PCR检测方法的建立和应用
2008-10-15分类号:S941
【部门】华中农业大学水产学院 深圳出入境检验检疫局 山东出入境检验检疫局
【摘要】选取杀鲑气单胞菌A层A蛋白(VapA)保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针。以ATCC标准株10倍系列稀释,通过血球计数板计数后进行实时定量PCR,制作标准曲线。通过SDS软件获得细菌数量(X)与Ct值的关系为:Ct=-3.1574lgX+43.6841(相关系数R2=0.992)。实时定量PCR的检测限为6个细菌。建立的方法对杀鲑气单胞菌典型株和非典型株具有较好的特异性,与其他细菌没有交叉反应。杀鲑气单胞菌实时定量PCR方法的建立,对于快速口岸检疫、临床诊断和疫病监测具有重要的应用价值。
【关键词】杀鲑气单胞菌 实时定量PCR Taqman探针
【基金】国家质检总局2006年科研项目(2006IK003)资助
【所属期刊栏目】海洋水产研究
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