虹彩病毒蛙病毒属病毒实时荧光PCR检测方法的建立
2008-04-15分类号:S941
【部门】华中农业大学水产学院 深圳出入境检验检疫局 山东出入境检验检疫局 深圳出入境检验检疫局 华中农业大学水产学院 深圳出入境检验检疫局 深圳出入境检验检疫局 华中农业大学水产学院 武汉430070 深圳518001 青岛266002 深圳518001 武汉430070 深圳518001 深圳518001 武汉430070
【摘要】在GenBank中搜寻虹彩病毒蛙病毒属主衣壳蛋白(MCP)基因序列并进行多重比较后,利用其中的保守序列,设计引物和Taqman探针,建立了虹彩病毒蛙病毒属实时荧光PCR检测方法。对荧光PCR反应条件进行优化,评估该检测方法的特异性、稳定性和重复性,利用10倍系列稀释法检验其灵敏度并与常规PCR做了比较。结果显示,该方法对虹彩病毒蛙病毒属成员(新加坡石斑鱼虹彩病毒除外)的检测有高度的特异性,与淋巴囊肿病毒、鳜鱼传染性脾肾坏死病毒、真鲷虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒等其他水生动物病毒之间均无交叉反应,有良好的特异性,检测总DNA灵敏度为4.5×10-3pg/μL,比传统PCR的敏感度高出100倍,可对低病...
【关键词】虹彩病毒蛙病毒属 实时荧光定量PCR 检测
【基金】国家高技术研究发展计划(“863”计划)(2006AA100306); 国家质量监督检验检疫总局科研项目(2006IK003); 深圳出入境检验检疫局科研课题(SZK33-2005)资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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