M蛋白基因shRNA抑制PRRSV在Marc145细胞中复制的研究
2008-01-10分类号：S858.28;S852.65
【部门】南京农业大学动物医学院/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学动物医学院/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学动物医学院/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学动物医学院/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京210095 南京210095 南京210095 南京210095
【摘要】【目的】通过靶向PRRSV基因组中的M基因的siRNA来抑制PRRSV在Marc145细胞中的复制。【方法】构建4个能转录小发夹RNA(shRNA)的质粒,将其与靶蛋白表达质粒共转染HEK293A细胞,观察荧光或进行半定量PCR;或将其转染Marc145细胞,感染PRRSV后进行IFA、TCID50和实时PCR检测。【结果】shRNA表达质粒对M融合蛋白表达的抑制率约为50%,使M真核质粒表达蛋白的mRNA水平降低54%～64%,表达的shRNA在PRRSV感染后48h使病毒的TCID50和mRNA水平均降低到1/10～1/100倍,间接免疫荧光结果表明shRNA表达质粒转染孔的荧光细胞数显著...
【关键词】PRRSV RNA干扰 M蛋白基因
【基金】国家自然科学基金(30471288;30270990); 江苏省自然科学基金(BK2005093); 教育部博士点基金项目(20030307012)
【所属期刊栏目】中国农业科学
文献传递
