检测石蜡切片中鸭病毒性肠炎病毒间接原位PCR方法的建立
2008-12-10分类号：S852.65
【部门】四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心 动物疫病与人类健康四川省重点实验室
【摘要】【目的】建立能对石蜡切片中鸭病毒性肠炎病毒(DEV)核酸进行定位的原位PCR方法,为鸭病毒性肠炎(DVE)存档蜡块的回顾性诊断、致病机理研究等提供有效的实验手段。【方法】据DEV的UL30-UL31基因序列设计PCR引物和寡核苷酸探针,以DEV感染死亡鸭肝脏组织石蜡标本制作切片,经蛋白酶K消化、原位PCR扩增和生物素标记的寡核苷酸探针原位杂交,建立了检测石蜡标本中DEV的间接原位PCR方法并应用于人工感染DEV不同时间的鸭肝脏、DVE发病鸭的存档蜡块和临床病料检测。【结果】间接原位PCR对DVE死亡鸭肝脏的石蜡标本检测结果为阳性,而鸭病毒性肝炎、鸭疫里默氏杆菌病、鸭多杀性巴氏杆菌病、鸭沙门氏菌...
【关键词】鸭病毒性肠炎病毒 原位PCR 寡核苷酸探针 石蜡标本 检测
【基金】教育部“新世纪优秀人才支持计划”项目(NCET-04-0906/NCET-06-0818); 国家自然科学基金项目(30771598); 高等学校科技创新工程重大项目培育资金项目(706050); 国家“十一五”科技支撑计划(2007Z06-017); 四川省十五攻关重大生物技术项目(01NG018-01); 四川重点攻关项目(05NG002-003); 四川省基础研究项目(07JY029-016/07JY029-017)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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