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犬α_1干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其抗病毒活性研究

2008-10-30分类号:S852.5

【作者】曹瑞兵  王艳  魏建超  陈溥言  
【部门】南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室  
【摘要】亚克隆犬α1干扰素(CaIFN-α1)成熟蛋白编码基因并克隆到表达载体pPICZα-A,构建转移重组载体pPICZα-A-CaIFN-α。pPICZα-A-CaIFN-α经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。转化子经PCR分析鉴定后利用甘油增菌和甲醇诱导,实现了CaIFN-α1在毕赤酵母系统中的分泌表达。SDS-PAGE检测结果表明表达产物相对分子质量约为2.7×104,比其推导结果(约1.9×104)大,推测可能是发生了糖基化。酵母分泌表达的CaIFN-α1具有较高的抗病毒活性,约为1.45×106U·mL-1,蛋白含量约为96mg·L-1,比活性为1.49×107U·mg-...
【关键词】犬α干扰素  毕赤酵母  分泌表达  抗病毒活性
【基金】国家青年自然科学基金项目(30600018); 南京农业大学青年科技创新基金项目(KJ05013)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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