猫β干扰素基因的克隆及表达
2008-04-15分类号:S852.5
【部门】沈阳农业大学畜牧兽医学院 沈阳农业大学畜牧兽医学院 沈阳农业大学畜牧兽医学院 沈阳110161 沈阳110161 沈阳110161
【摘要】根据GeneBank上的猫IFN-β基因序列,设计了1对特异性引物,对猫肝组织中提取的DNA进行PCR扩增,然后将扩增产物插入pUCm-T克隆载体进行了克隆。测序分析表明,克隆的IFN-β基因序列与GeneBank中的基因(NM_001009297)存在一个碱基差异,第446位碱基由T变为C,二者同源性高达99.82%,同时这个碱基的差异没有引起氨基酸的改变。将其双酶切后插入原核表达载体pGEX-KG,构建成功重组表达载体pGEX-IFNB,将其转化BL21(DE3)后成功进行了诱导表达。SDS-PAGE和Western-Blot分析表明,在35KDa处出现蛋白表达条带,表达量占菌体蛋白的12...
【关键词】β干扰素 猫 克隆 表达
【基金】沈阳农业大学青年教师科研基金资助项目(2006119)
【所属期刊栏目】沈阳农业大学学报
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