猪α干扰素基因的表达及其单克隆抗体的制备与鉴定
2008-06-15分类号:S852.4
【部门】华中农业大学动物医学院 华中农业大学动物医学院 华中农业大学动物医学院 华中农业大学动物医学院 华中农业大学动物医学院 武汉430070 武汉430070 武汉430070 武汉430070 武汉430070
【摘要】将猪IFN-α(poIFN-α)成熟蛋白基因克隆于pET-28a载体中,转染大肠杆菌,并进行诱导表达。经SDS-PAGE检测,融合表达的蛋白poIFN-α大小约27 ku。收获融合表达的poIFN-α,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过间接ELISA方法对融合细胞进行检测,结果获得了1株能稳定分泌抗poIFN-α蛋白抗体的杂交瘤细胞株,命名为2H12株。Western-blotting结果及单克隆抗体亚型鉴定结果表明,单抗与重组蛋白发生特异性反应,单抗为IgG1亚型,且轻链为κ链。
【关键词】猪 α-干扰素 原核表达 单克隆抗体
【基金】国家自然科学基金项目(30270952)资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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