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鸭MHCⅡα融合蛋白表达条件的优化

2008-02-15分类号:S852.4

【作者】张舒婕  邓干臻  龚炎长  俸艳萍  杨庆磊  高俊伟  彭秀丽  
【部门】华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室  华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室  华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室  华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室  华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室  华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室  华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室 武汉430070  武汉430070  武汉430070  武汉430070  武汉430070  武汉430070  武汉430070
【摘要】构建了鸭MHCⅡα的融合表达载体PET-28a,对融合蛋白在大肠杆菌中表达量的影响因素进行了研究。SDS-PAGE分析表明,诱导温度22℃,时间3 h,IPTG浓度0.05 mmol/L,OD600 nm值0.45,通气量90%和pH 7.2时MHCⅡα融合蛋白的表达量最高,占菌体总蛋白的23.4%,比优化前提高了16.7%。蛋白经纯化后纯度可达90%。Western blot分析表明,该蛋白可被鼠抗鸭MHCⅡα阳性血清识别,具有较好的免疫学活性。
【关键词】鸭  MHCⅡα  融合蛋白  表达条件
【基金】湖北省“十一五”重大攻关项目(2006AA202A03)资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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