鸡骨保护素(chOPG)的原核表达、纯化及抗体制备
2008-04-10分类号:S852.4
【部门】南京农业大学动物医学院 南京农业大学动物医学院 南京农业大学动物医学院 南京农业大学动物医学院 南京210095 南京210095 南京210095 南京210095
【摘要】【目的】骨保护素(OPG)是一种新发现能抑制前体破骨细胞分化及成熟破骨细胞活性的蛋白,本文旨在从体外扩增、表达鸡骨保护素(chOPG)蛋白,并制备其多克隆抗体,为深入研究它的生物学功能奠定基础。【方法】以体外培养的鸡胚成骨细胞中提取的总RNA为模板,利用RT-PCR方法,扩增出chOPG基因,测序后克隆至原核表达载体pET-32a(+),成功构建了原核表达质粒pET-32a(+)-OPG,重组质粒转化Rosetta-gami(DE3)pLysS,经IPTG诱导表达。【结果】表达产物经SDS-PAGE电泳,发现目的蛋白大小约为63kD,占菌体总蛋白的11.9%,Western blotting分...
【关键词】鸡 骨保护素 原核表达 纯化 抗体
【基金】江苏省自然科学基金(BK2004099); 教育部重点项目(107059); 教育部高校博士点基金(20040307036)
【所属期刊栏目】中国农业科学
文献传递