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人、牛和羊叠朊基因的表达及牛叠朊蛋白抗血清的制备

2008-06-15分类号:S852;Q78

【作者】刘永生  唐江山  路伟  陈豪泰  孙德惠  才学鹏  张杰  
【部门】中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室  中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室  中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室  中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室  中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室  中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室  中国农业科学院兰州兽医研...
【摘要】叠朊(Dpl)是朊蛋白(PrP)的横向同源物,两者的功能密切相关。本研究旨在制备能够特异检测重组表达的或者动物组织中Dpl的抗血清,以用于研究Dpl的功能及其与PrP的关系。根据已克隆的汉族人、中国黄牛、甘肃土种羊的Dpl基因,将其Dpl成熟蛋白编码区分别定向克隆到表达载体pET-30a(+)上,将重组表达载体转入E.coliBL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达。将表达并纯化的牛重组Dpl免疫4只青紫蓝兔,制备牛Dpl的抗血清,SDS-PAGE分析表明人、牛和羊的重组Dpl在E.coli中获得了高效表达。用Ni-NTA树脂亲和层析和胶洗脱法纯化了上述表达产物,ELISA和West-b...
【关键词】传染性海绵状脑病  叠朊  朊蛋白  基因表达  抗血清
【基金】国家自然科学基金资助项目(3067156330700597); 甘肃省科技攻关重点资助项目(2GS042-A41-001-09); 甘肃省自然科学基金资助项目(3ZS051-A25-065); 国家博士后科学基金资助项目(20040350585)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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