H9N2亚型猪流感病毒NS1基因的克隆表达及反应原性分析
2008-02-10分类号：S852.65
【部门】山东农业大学动物科技学院 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所 杭州310021 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所 山东农业大学动物科技学院 山东泰安272018 杭州310021 杭州310021 杭州310021 杭州310021 山东泰安272018
【摘要】【目的】对H9N2亚型猪流感病毒NS1(nonstructural protein1)基因进行原核表达,获得纯化表达产物,以期为检测猪流感抗体的ELISA试剂盒的研制奠定基础。【方法】采用RT-PCR扩增了猪流感病毒(H9N2)的NS1基因,将其克隆于表达载体pET-28a(+)上构建成重组质粒pET-NS1,转化受体菌E.coliBL21-DE3感受态细胞,经酶切鉴定及序列分析,筛选出正确重组质粒转化子。【结果】经终浓度5mmol·L-1乳糖诱导,SDS-PAGE电泳结果显示,重组蛋白NS1得到大量表达,分子质量约为26kD。经Western-blotting分析,表达蛋白能与阳性血清发生特...
【关键词】猪流感病毒 NS1基因 反应原性
【基金】浙江省科技计划重点项目(2004C22044)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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