油桐ISSR-PCR最佳反应体系的建立
2008-04-15分类号：S794.3
【部门】安徽师范大学生命科学学院 中国林业科学研究院亚热带林业研究所 中国林业科学研究院亚热带林业研究所 安徽师范大学生命科学学院 安徽芜湖241000 中国林业科学研究院亚热带林业研究所 浙江富阳311400 浙江富阳311400 浙江富阳311400 安徽芜湖241000
【摘要】在油桐遗传多样性研究中,为了获得清晰可靠、重复性强的ISSR扩增结果,综合采用单因子试验和正交设计两种方法对影响油桐ISSR-PCR反应结果的4个因素(Taq酶、Mg2+、dNTP、引物)进行优化试验。单因子试验分别研究各因素对ISSR-PCR反应的影响,找出最佳反应水平。正交设计选用L9(34)方案,采用直观分析获得影响因素最佳反应水平。通过综合比较分析,最终建立了油桐ISSR-PCR反应的最佳反应体系,即在20μL反应体系中,Taq DNA聚合酶1.0 U,Mg2+2.0 mmol.L-1,dNTP 0.20 mmol.L-1,引物0.4μmol.L-1,1×PCR缓冲液,40 ng模板D...
【关键词】油桐 ISSR-PCR 单因子试验 正交设计
【基金】浙江省重大科技攻关项目“油茶油桐乌桕三种木本油料能源树种新品种选育及中试”(2006C12016)
【所属期刊栏目】林业科学研究
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