银杏ISSR-PCR扩增反应体系的优化
2008-04-15分类号:S792.95
【部门】南京林业大学森林资源与环境学院 南京林业大学森林资源与环境学院 南京林业大学森林资源与环境学院 南京林业大学森林资源与环境学院 江苏南京210037 江苏南京210037 江苏南京210037 江苏南京210037
【摘要】为了对影响银杏Gingko biloba简单序列重复区间扩增-聚合酶链式反应(ISSR-PCR)扩增反应体系的因素进行优化,采用ISSR-PCR扩增技术和UVP凝胶电泳成像技术对模板DNA浓度、Taq酶用量、引物用量、dNTP的用量以及退火温度等因素进行筛选和优化。筛选优化后的反应条件:Taq酶0.3μg,2μL 10×Buffer(含15 mmol.L-1MgCl2),模板DNA40 ng,dNTP 0.2 mmol.L-1,引物0.5μmol.L-1,Mg2+1.5 mmol.L-1。PCR扩增程序:94℃变性5 min,然后进行38个循环:94℃变性30 s,48~53℃(根据引物而定)...
【关键词】林木育种学 银杏 ISSR-PCR 反应体系
【基金】“十一五”国家科技支撑项目(2006BAD18B0301)
【所属期刊栏目】浙江林学院学报
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