利用SMART技术构建珙桐叶片全长cDNA文库
2008-12-15分类号:S792.99
【部门】中南林业科技大学
【摘要】以珙桐叶片为研究材料,用Rneasy Plant Mini Kit提取珙桐叶片组织总RNA,反转录成单链cDNA,长距离PCR方法合成双链cDNA;PCR产物经蛋白酶K消化、SfiI酶切后,采用CHROMA SPIN-400柱分级分离,回收0.5 kb以上的cDNA组分,以λTriplEx2载体连接并进行体外包装,构建了珙桐叶全长cDNA文库.结果表明:以XL1-Blue、BM25.8为受体菌测定的原始文库滴度为8.3×106pfu/mL,扩增后文库总滴度为4.16×108pfu/mL,重组率为97.3%;对随机挑取的噬菌斑进行PCR鉴定,表明插入片段大多分布在0.5~2.0 kb之间,文库质...
【关键词】生物技术 珙桐 叶 全长cDNA文库 SMART技术
【基金】湖南省自然科学基金(03JJY3064); 教育部留学人员科研启动基金联合资助(2007-1)
【所属期刊栏目】中南林业科技大学学报
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