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百合叶片总RNA提取方法比较及优化

2008-08-15分类号:S682.29

【作者】尹慧  陈莉  李晓艳  陈秋明  义鸣放  
【部门】中国农业大学农学与生物技术学院  中国农业大学农学与生物技术学院  中国农业大学农学与生物技术学院  中国农业大学农学与生物技术学院  中国农业大学农学与生物技术学院 北京100193  北京100193  北京100193  北京100193  北京100193
【摘要】为筛选出适合百合叶片RNA提取方法,以铁炮百合‘白天堂’组培苗叶片为材料,比较了改进的CTAB、SDS及传统的Trizol、CTAB、SDS方法提取RNA的效果。结果表明:不论传统及改进的SDS法和Trizol法均不能有效去除百合叶片组织中的多糖、蛋白等杂质,传统CTAB法提取RNA存在DNA污染。针对百合叶片组织富含多糖多酚的特点,改进了CTAB法,采用醋酸钠及无水乙醇去除多糖,酚/氯仿反复抽提去除蛋白,DNaseⅠ去除DNA,LiCl有效沉淀RNA。采用此方法提取的RNA条带清晰,经紫外光谱分析D260/D280比值为2.0,D260/D230为2.1,电泳28S、18S条带清晰,比值约为...
【关键词】百合  叶片  RNA提取  CTAB改进法  多糖  RT-PCR
【基金】北京市科委资助项目(D0606003040291)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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