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沙棘木蠹蛾AFLP引物筛选及反应体系的建立

2008-07-15分类号:S763.7

【作者】陈敏  陶静  马超德  尹伟伦  朱杨煜  宗世祥  骆有庆  
【部门】北京林业大学省部共建森林培育与保护教育部重点实验室  北京林业大学省部共建森林培育与保护教育部重点实验室  
【摘要】该文以沙棘木蠹蛾幼虫为材料,用改进的SDS-蛋白酶K法获得了高质量的符合AFLP分析要求的基因组DNA。通过对AFLP试验过程中的酶切-连接、预扩增、选择性扩增等各关键因素的比较研究,建立了一套优化的沙棘木蠹蛾AFLP分子标记体系,获得了清晰的指纹图谱。研究结果表明:利用EcoRⅠ/MseⅠ双酶切系统以酶切-连接2~4 h,预扩增产物稀释20倍、Mg2+浓度为1.5 mol/mL的选择性扩增效果最好。进一步利用该反应体系从80对E+3/M+3选择性引物中筛选出10对多态性丰富、分辨率高、谱带清晰的引物组合。该研究结果为利用AFLP标记技术开展沙棘木蠹蛾的种群遗传结构、遗传分化等方面的研究奠定了...
【关键词】沙棘木蠹蛾  AFLP标记  体系建立  引物筛选
【基金】国家自然科学基金重点项目(30730075); 北京林业大学振兴计划项目(200302002); 长江学者与创新团队发展计划项目(PCSIRT0607)
【所属期刊栏目】北京林业大学学报
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