桃SRAP-PCR反应体系的建立与优化
2008-10-28分类号:S662.1
【部门】西北农林科技大学园艺学院
【摘要】建立适宜桃基因组DNA的SRAP-PCR扩增体系,为桃基因图谱的构建和分子标记打下基础。以桃基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从dNTPs、Mg2+、Taq酶、引物、模板5种因素4个水平对桃SRAP-PCR反应体系进行优化,所建立的体系为25μL:dNTPs为0.12 mmol/L,Mg2+为4 mmol/L,Taq酶2 U,引物为0.3 mmol/L,模板DNA50ng。PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性l min,35℃复性l min,72℃延伸l min,5个循环;94℃变性l min,50℃复性l min,72℃延伸l min,35个循环,72℃延伸10 min。
【关键词】桃 SRAP 优化 正交试验
【基金】陕西省攻关项目(2006K01-G27-01); 农业部“948”项目(2006-G27)
【所属期刊栏目】华北农学报
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