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苦瓜MAP30基因的克隆与载体构建

2008-06-28分类号:S642.5

【作者】杨英军  李亚蝉  
【部门】河南科技大学林学院  河南科技大学林学院 河南洛阳471003  河南洛阳471003
【摘要】首先提取苦瓜的基因组DNA,然后根据Genbank中已公开发表的MAP30序列,设计一对特异引物MAP301,MAP302,并增添特异定位于内质网的小肽Kozak序列。采用PCR技术,从苦瓜的基因组DNA中扩增出一分子量为800bp左右的片段,回收克隆测序,结果表明,克隆获得片段与已公开发表的MAP30序列同源性达100%,将阳性克隆进行酶切,获得的目标片段与用同样酶切所获得的植物表达载体pEV1和pEV2大片段连接,酶切鉴定重组子构建成特异表达于果实的载体。
【关键词】苦瓜  MAP30  载体构建  PCR
【基金】河南省高等学校青年骨干教师资助计划(豫教高[2005]461号); 河南科技大学人才科学研究基金资助(05018)
【所属期刊栏目】华北农学报
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