高效银耳芽孢遗传转化体系的建立
2008-11-10分类号：S567.34
【部门】华南农业大学食品学院 华南农业大学生物质能研究所
【摘要】【目的】建立PEG介导的高效银耳(Tremella fuciformis)芽孢遗传转化体系。【方法】采用PEG介导的原生质体法把表达质粒pAN7-1(含有构巢曲霉gpd-An启动子和潮霉素抗性基因hph)和pLg-hph(含香菇gpd-Le启动子和hph基因)转化进银耳芽孢的细胞中;采用夹层法在含50μg·ml-1潮霉素的筛选培养基中初筛银耳芽孢假定转化子,之后转接于潮霉素含量为100μg·ml-1的PDA平板上进行第2次筛选。【结果】PEG4000浓度为25%时介导的银耳芽孢原生质体初转化率最高;pLg-hph假定转化子经过PCR鉴定及Southern杂交验证,结果表明hph基因能有效整合进...
【关键词】银耳 PEG介导转化 银耳芽孢 hph基因
【基金】国家“863”计划项目(2006AA10Z301); 国家自然科学基金(30371000,30671457); 广东省自然科学基金(5006680,032239)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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