苎麻UDPGDH原核表达载体的构建与表达
2008-06-15分类号:S563.1
【部门】湖南农业大学苎麻研究所 湖南农业大学苎麻研究所 湖南农业大学生物科学技术学院 长沙市烟草公司浏阳市营销部 湖南农业大学生物科学技术学院 长沙学院生物工程与环境科学系 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南浏阳410300 湖南长沙410128 湖南长沙410003
【摘要】通过RT-PCR获得UDPGDH cDNA序列,经酶切、连接,以pET-32a为原核表达载体,构建成pET-32a-UDPGDH重组表达载体.经酶切、PCR及DNA测序鉴定后,将阳性质粒转化表达受体菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后表达出1个约53 000的蛋白,与推测的UDPGDH编码产物的大小一致.凝胶成像分析表明,最高表达量可占菌体总蛋白的47.1%,表明UDPGDH重组载体在大肠杆菌中获得了稳定的表达.
【关键词】苎麻 尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶(UDPGDH) 表达分析
【基金】国家自然科学基金项目(30571186)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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