非洲菊SRAP标记的DNA模板制备及反应体系优化
2008-04-15分类号：S682.11
【部门】湖南农业大学园艺园林学院 湖南农业大学园艺园林学院 湖南农业大学园艺园林学院 湖南农业大学园艺园林学院 湖南农业大学园艺园林学院 湖南农业大学园艺园林学院 湖南农业大学园艺园林学院 湖南农业大学园艺园林学院 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南长沙410128
【摘要】为获得非洲菊清晰的SRAP标记图谱,对非洲菊DNA的提取方法及其SRAP-PCR反应体系的影响因子进行了初步探讨,建立了扩增多态性高、重复性好、带型清晰的DNA模板和SRAP-PCR反应体系.最佳SPAR-PCR反应体系:在50μL的反应总体系中,Mg2+2.0mmol/L,dNTPs0.3mmol/L,DNA模板100ng,DNA聚合酶2.0U,上游、下游引物各0.22mmol/L.扩增程序:在94℃预变性4min,反应前5个循环在94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min的条件下运行,随后的30个循环复性温度提高到55℃,最后72℃延伸5min.
【关键词】非洲菊 DNA模板 SRAP-PCR反应体系
【基金】湖南省教育厅项目(06JJG05)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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