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磁珠富集法分离柿微卫星标记

2008-05-10分类号:S665.2

【作者】阮小凤  Gabi Krczal  杨勇  
【部门】西北农林科技大学园艺学院  莱茵兰普法尔茨州植物研究所  西北农林科技大学园艺学院 陕西杨凌712100  67435 Neustadt/Weinstraβe  德国  陕西杨凌712100
【摘要】【目的】分离柿属植物的微卫星标记,为柿种质资源的分类、进化等遗传研究奠定基础。【方法】提取磨盘柿(Diospyros kaki)基因组DNA后,用EcoRⅠ和MesⅠ2种内切酶酶切并连接接头,再用接头特异引物进行PCR扩增。扩增产物与生物素标记的(GA)15和(AC)15探针杂交,杂交复合物用链亲和素包裹磁珠进行结合,得到单链DNA目标片段,经PCR扩增,连接pGEM-T载体,转化入感受态大肠杆菌,得到微卫星富集小插入片段DNA文库。用Colony-PCR法筛选阳性克隆,进行测序分析。【结果】测序96个克隆,54个含微卫星序列,24个为有效微卫星序列,其中完美型(perfect)9个,占37....
【关键词】柿  微卫星  磁珠富集
【基金】科技部国家科技基础条件平台项目(2005DKA21002-22)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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