适于黄瓜叶片蛋白质组分析的双向电泳方法最佳条件的研究
2008-06-15分类号:S642.2
【部门】沈阳农业大学生物科学技术学院 上海交通大学农业与生物技术学院 沈阳农业大学生物科学技术学院 水利部水土保持植物开发管理中心 沈阳农业大学生物科学技术学院 沈阳110161 上海201101 沈阳110161 北京100038 沈阳110161
【摘要】为建立适于黄瓜叶片蛋白质组分析的双向电泳方法,对黄瓜叶片蛋白提取方法、裂解缓冲液、等电聚焦(IEF)参数进行研究。结果表明:丙酮法或三氯乙酸/丙酮法提取黄瓜蛋白质较好,2-DE图谱中蛋白点较多;裂解缓冲液为9.5mol·L-1尿素,2mol·L-1硫脲,1%二硫苏糖醇(DTT),2mmol·L-1三丁基磷(TBP),4%3-[3-(胆酰氨丙基)二甲铵基]丙磺酸内盐(CHAPS),0.2%两性电解质,0.002%溴酚蓝,0.25%吐温20,10%异丙醇,5%甘油,10mmol.L-1苯甲基磺酰氟(PMSF)时,电泳图谱效果最好;IEF等电聚焦条件为25000Vh时,2-DE图谱蛋白点多且清晰。
【关键词】蛋白质组 双向电泳 黄瓜
【基金】国家自然科学基金项目(30700542); 辽宁省博士启动基金项目(1040179)
【所属期刊栏目】沈阳农业大学学报
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