盾叶薯蓣ISSR-PCR扩增条件研究
2008-02-15分类号:S567.239
【部门】河南农业大学林学园艺学院 河南农业大学林学园艺学院 华中农业大学食品科技学院 河南农业大学林学园艺学院 郑州450002 郑州450002 武汉430070 郑州450002
【摘要】以盾叶薯蓣的叶片制备ISSR-PCR DNA模板。通过单因子试验分别研究了模板DNA质量和浓度、Mg2+浓度、Taq酶用量、dNTPs浓度以及退火温度对盾叶薯蓣ISSR-PCR扩增的影响,建立了适宜于盾叶薯蓣的ISSR反应体系和扩增参数,即15μL反应体系中包括:20 ng/L模板DNA,1×Taq酶缓冲液,1.0 UTaq聚合酶,2.5 mmol/L MgCl2,0.2μmol/L引物和0.3 mmol/L dNTPs。并从46个ISSR引物中筛选出10个带纹清晰、多态性丰富的引物,并确定了这些引物的适宜退火温度。
【关键词】盾叶薯蓣 ISSR-PCR 扩增参数 种质资源
【基金】河南省“十五”科技攻关项目(0322010900); 河南农业大学博士启动基金项目(30400247)资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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