农杆菌介导大豆子叶节转化系统的优化
2008-04-10分类号:S565.1
【部门】东北农业大学农学院 东北农业大学/国家教育部大豆生物学重点实验室 东北农业大学农学院 东北农业大学/国家教育部大豆生物学重点实验室 哈尔滨150030 哈尔滨150030 哈尔滨150030 哈尔滨150030
【摘要】【目的】研究影响大豆(Glycine maxL.)子叶节外植体遗传转化的因素。【方法】以农杆菌转化系统为平台,用直接筛选法和延迟筛选法确定卡那霉素的筛选方法和浓度,以GUS基因的瞬时表达计算子叶节区GUS阳性率。【结果】延迟7d进行Km选择、筛选压力为75mg·L-1时选择效果最好;菌株培养阶段和侵染浓度分别在OD600为0.6和0.5时子叶节区GUS阳性率最高;黑农35、绥农14和合丰35为易感的大豆基因型;农杆菌菌株EHA101对大豆的转化能力好于LBA4404和AGL1;共培养培养基中添加的硫醇类化合物对T-DNA的转移有极强的影响效应。【结论】本实验方法可以优化农杆菌介导的大豆子叶节转...
【关键词】大豆 子叶节 农杆菌 转化系统 T-DNA
【基金】黑龙江省科技攻关项目(GB04B101)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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