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棉铃虫中肠Cry1A受体蛋白氨肽酶N1在Tn细胞系的表达

2008-06-10分类号:S435.62

【作者】常洪雷  梁革梅  王桂荣  于宏坤  吴孔明  郭予元  
【部门】中国农业科学研究院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室  中国农业科学研究院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室  中国农业科学研究院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室  中国农业科学研究院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室  中国农业科学研究院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室  中国农业科学研究院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室 北京100094  北京100094  北京100094  北京100094  北京100094  北京100094
【摘要】【目的】将棉铃虫中肠Bt受体蛋白在真核表达系统中成功表达。【方法】用PCR方法分别扩增出对Cry1Ac毒素敏感和抗性棉铃虫的中肠氨肽酶N1(APN1)基因的去信号肽片段,将其克隆至pUC19载体,测定核酸序列后,克隆入Bac-to-Bac表达系统中杆状病毒转移载体pFastBacHTB中多角体基因启动子的下游,筛选出重组质粒pFastBacHTB/APN1并转化大肠杆菌DH10Bac,在体内进行重组,经抗性和蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组载体Bacmid/APN1。转染粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)细胞(Tn-5B1-4),获得含APN1基因的重组杆状病毒,重组病毒感染Tn细胞后,得...
【关键词】APN  杆状病毒表达载体  Tn  表达
【基金】国家自然科学基金资助项目(30200182); 国家“973”项目(2006CB102004)资助
【所属期刊栏目】中国农业科学
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