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小麦ERF类转录因子W17的结合特异性及亚细胞定位分析

2008-06-10分类号:S512.1

【作者】赵云祥  徐兆师  陈明  李连城  陈耀锋  邱志刚  熊祥进  马有志  
【部门】西北农林科技大学农学院  中国农业科学院作物科学研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室  中国农业科学院作物科学研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室  中国农业科学院作物科学研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室  西北农林科技大学农学院  中国农业科学院作物科学研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室  中国农业科学院作物科学研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室  中国农业科学院作物科学...
【摘要】【目的】构建ERF(ethylene-responsive element binding factor)转录因子基因W17的亚细胞定位载体和原核表达载体,验证W17是否具有核定位功能,阐明W17与GCC、DRE探针的体外结合特性,利用GUS瞬时表达系统分析W17蛋白的体内结合特性和转录激活功能,初步预测W17在植物胁迫信号传导途径中的作用。【方法】构建W17/163hGFP亚细胞定位载体,基因枪转化洋葱表皮细胞,暗培养24h后共聚焦显微镜下观察。构建W17/pGEX-4T-1原核表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG(0.5mmol·L-1,3h)诱导,GST纯化柱纯化,纯化的融...
【关键词】ERF/AP2结构域  ERF  DRE元件  GCC-box  亚细胞定位  小麦
【基金】国家高技术研究发展计划(“863”计划)项目(2007AA10Z130); 国家自然科学基金项目(30700504)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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