单链抗体hs83基因植物表达载体的构建
2008-02-28分类号:Q943.2
【部门】西南交通大学生物工程学院 四川省农科院生物技术核技术研究所 四川省农科院生物技术核技术研究所 西南交通大学生物工程学院 四川省农科院生物技术核技术研究所 四川成都610031 四川省农科院生物技术核技术研究所 四川成都610066 四川成都610066 四川成都610066 四川成都610031 四川成都610066
【摘要】成功构建了单链抗体hs83基因植物表达载体pCAMB IA1301-hs83。首先根据基因的序列重新设计了两条含有合适酶切位点的引物,酶切位点保证了基因能够插入取代pCAMB IA1301上GUS基因的第二外显子;第二步是PCR反应克隆目的基因,然后连接到pMD-18 T载体,进行测序鉴定;第三步是对pCAMB IA1301质粒和T-hs83质粒进行双酶切,释放出两个目的片段,分别回收后连接,酶切鉴定后将重组子通过冻融法转化根癌农杆菌EHA105,并用PCR法进行鉴定。
【关键词】hs83基因 植物表达载体 pCAMBIA1301 PCR 农杆菌
【基金】国家“十一五”863薯类作物分子育种项目; 四川省“十一五”生物技术重点攻关项目资助
【所属期刊栏目】西南农业学报
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