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小鼠胚胎诱导型Hsp70基因的RNA干扰有效序列筛选

2008-09-15分类号:Q78

【作者】王明志  田文儒  姜同泉  任登良  田中杰  屈平平  曹荣峰  
【部门】青岛农业大学动物科技学院  
【摘要】【目的】应用RNA干扰技术沉默小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblast,MEF)中诱导型热休克蛋白70(Hsp72)基因的表达,从而筛选出对Hsp72基因具有确实干扰作用的siRNA。【方法】设计并合成4对特异性针对Hsp72基因的siRNA,借助LipofectamineTM2000瞬时转染MEF,41℃热应激处理后,采用RT-PCR和Western blot检测Hsp70 mRNA和Hsp70蛋白表达量。【结果】在热应激组中,siRNA1、siRNA2两组及阳性、阴性和空白3个对照组的Hsp70 mRNA和Hsp70蛋白表达量均极显著高于常温对照组(P<0....
【关键词】RNA干扰  小鼠胚胎成纤维细胞  小干扰RNA
【基金】国家自然科学基金资助项目(30571338)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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