肉鸡HSP70的基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备
2008-07-10分类号：Q78
【部门】南京农业大学动物医学院 农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心 农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心 农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心 农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心 南京农业大学动物医学院 南京210095 临沂大学农林学院 山东临沂276005 山东青岛266032 山东青岛266032 山东青岛266032 山东青岛266032 南京210095
【摘要】【目的】制备高特异性的肉鸡热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)单克隆抗体,研究肉鸡HSP70与热应激损伤的关系。【方法】利用RT-PCR方法扩增肉鸡HSP70mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy载体和原核表达载体pET-28a(+)上,进一步转化至大肠杆菌BL-21中,用IPTG诱导表达重组肉鸡HSP70。以纯化的重组肉鸡HSP70制备多克隆抗体,免疫印迹分析说明重组肉鸡HSP70具有很好的免疫原性。以纯化的重组肉鸡HSP70免疫Balb/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。【结果】获得2株分泌肉鸡HSP70单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进...
【关键词】热休克蛋白70 原核表达 单克隆抗体制备 肉鸡
【基金】国家自然科学基金资助项目(30170682,30571400); 教育部博士点基金项目(20050307008)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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