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福州地区小菜蛾全长cDNA文库构建与分析

2008-09-18分类号:S433

【作者】孔祥广  赵红霞  李江红  吴刚  
【部门】福建农林大学植物保护学院  福建农林大学蜂学学院  
【摘要】采用ZAP Express cDNA Gigapack Ⅲ Gold Cloning Kit试剂盒,构建了小菜蛾(Plutella xylostella)的全长cDNA文库.利用TRIzol试剂盒提取小菜蛾成虫总mRNA,通过Oligo试剂将mRNA反转录成cDNA,再以第一链cDNA产物为模板合成第二链cDNA,该cDNA产物经分级分离和体外包装,即获得小菜蛾cDNA原始文库,其滴度为1.5×106pfu.mL-1.扩增后的cDNA文库的滴度为1.4×1010pfu.mL-1.取适量扩增文库稀释并铺平板,挑取20-25个独立噬菌斑,用M13±通用引物PCR扩增后,测得文库的重组率大于95%,...
【关键词】小菜蛾  全长cDNA文库
【基金】国家自然科学基金(30771413); 科技部重点资助项目(05DFA30440)
【所属期刊栏目】福建农林大学学报(自然科学版)
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