拟南芥Alpha-dioxygenase 1的原核表达、纯化及活性的检测
2008-06-28分类号：Q943
【部门】西北农林科技大学生命科学学院 西北农林科技大学生命科学学院 西北农林科技大学生命科学学院 河南科技大学农学院 西北农林科技大学生命科学学院 西北农林科技大学生命科学学院 陕西杨凌712100 河南科技大学农学院 河南洛阳471003 陕西杨凌712100 陕西杨凌712100 河南洛阳471003 陕西杨凌712100 陕西省农业分子生物学重点实验室 陕西杨凌712100 陕西杨凌712100 陕西省农业分子生物学重点实验室 陕西杨凌712100
【摘要】从经水杨酸处理的拟南芥开花期植株中获得cDNA,扩增得到Alpha-dioxygenase 1(DOX1)基因,进行原核表达、纯化和生物活性检测。利用原核表达载体pMAL-c4x在T7 Express CompetentE.coli和BL21(DE3)-RIPL codon+菌株中表达DOX1,经Amylose Resin亲和层析柱纯化。SDS-PAGE结果表明,重组融合蛋白在BL21(DE3)-RIPL codon+中的表达通过灰度值比较分析以可溶性为主,表达率约3.7%,纯化的DOX1纯度可达45%。愈创木酚法表明,可溶性重组蛋白不具有过氧化物酶活性;2,4-DNP法测试表明可溶性重组蛋白...
【关键词】Alpha-dioxygenase1 重组表达 2 4-DNP 亲和纯化 活性
【基金】国家自然科学基金(30300222); 西北农林科技大学优秀人才基金(042R009)
【所属期刊栏目】华北农学报
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