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达兰猪精原干细胞的分离、纯化和初步鉴定

2008-04-15分类号:Q813

【作者】薛振华  刘国世  史建民  王梁  田秀芝  王永彬  侯保民  田见晖  曾申明  朱士恩  
【部门】中国农业大学动物科学技术学院  中国农业大学动物科学技术学院  中国农业大学动物科学技术学院  中国农业大学动物科学技术学院  中国农业大学动物科学技术学院  中国农业大学动物科学技术学院  内蒙古兴安盟科右中旗草原工作站  中国农业大学动物科学技术学院  中国农业大学动物科学技术学院  中国农业大学动物科学技术学院 北京100094  北京100094  农业生物技术国家重点实验室  北京100094  北京100094  北京100094  北京100094  北京100094  内蒙古巴彦胡舒029400  北京100094  农业生物技术国家重点实验室  北京100094  北京100094  农业生物技术国家重点实验室  北京1...
【摘要】对达兰仔猪睾丸精原细胞及精原干细胞进行了体外分离、纯化和初步鉴定。对8 d达兰仔猪的睾丸实质组织,采用Ⅳ型胶原酶、透明质酸酶和胰酶组合消化法分离精细管细胞,制备单细胞悬液,用Percoll不连续密度(11%、19%、27%、35%和43%)梯度法纯化精原细胞;对纯化后的细胞培养12 h,细胞贴壁后进行碱性磷酸酶(AKP)染色鉴定,初步确定精原干细胞及其比例。结果表明:所获精细管细胞悬液中活细胞和死细胞所占的比率分别为92.65%和7.35%,平均每克睾丸可获得4.17×107个细胞;精原细胞主要分布于19%~27%的Percoll梯度带中,经纯化后其纯度为47.62%,精原干细胞占该带细胞的比...
【关键词】达兰猪  精原干细胞  分离  纯化  精原细胞
【基金】北京市自然科学基金资助项目(5063044); 中国农业大学青年教师科研启动基金资助项目
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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